绝杀致病菌!“LAMP大法”联手“生物荧光技”放大招

来源: 2021-03-04 10:00      点击:
LAMP技术自2000年出现以来,以其快速、精确、高效的特性已经被广泛的应用。这项技术已经发展到商业化的检测试剂盒中,包括细菌和病毒的检测;这项技术由于其成本低,能够应用于发展中国家的基层的实验室中。
环介导等温
扩增 环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术是日本学者Notomi T于2000年发明的一种新的DNA扩增技术,该方法能够高效、特异、快速的在等温条件下完成。

通过一系列的链置换扩增反应在1h内就可以将靶基因扩增109倍,当靶基因为RNA时,该方法还可以通过在反应体系中添加反转录酶而实现对RNA的扩增;在LAMP反应中,会有大量的DNA合成,因此会产生很多焦磷酸根离子,这些焦磷酸根离子可以结合溶液中的二价Mg2+形成不溶的焦磷酸盐,便于对反应结果的观测,使扩增和检测一步就可以完成,大大提高检测效率。

扩增原理

LAMP 技术扩增反应的具体过程比较复杂。

启动阶段

在启动阶段,双链DNA 模板在等温( 60~65 ℃)的条件下,引物和DNA模板进行结合,在Bst聚合酶的作用下,启动链置换反应,产生一条双链DNA和一条单链DNA。单链DNA形成环状结构。

循环扩增阶段

环状结构形成一种茎-环结构作为LAMP反应中循环反应的起始结构,进入LAMP反应的循环扩增阶段。在循环扩增阶段,茎环结构进而形成哑铃环结构、花椰菜状结构,使产物的序列不断延伸、环化、再延伸,最终的产物是一些具有不同茎长度茎环结构的DNA 和带有许多环的类似花椰菜结构的DNA 的混合物。

 生物荧光信号检测

与常规PCR相比,环介导等温扩增是一种全新的核酸扩增方法,具有简单、快速、特异性强的特点。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术。

但是用浊度对LAMP结果检测时,其灵敏性受到影响。而基于生物发光方法结合LAMP技术可以有效地解决浊度检测带来的不足,实现强强联手的效应。

生物发光(bioluminescence)

是指生物体发光或生物体提取物在实验室中发光的现象。它不依赖于有机体对光的吸收,而是一种特殊类型的化学发光,化学能转变为光能的效率几乎为100%。也是氧化发光的一种。生物发光的一般机制是:由细胞合成的化学物质,在一种特殊酶的作用下,使化学能转化为光能。 ——《百度百科》
MDS分子检测系统

3M MDS分子检测系统正是基于生物发光方法结合LAMP技术研发的一款创新型产品,这种创新技术全面提升操作简便性、准确性、检测速度和性价比,使致病菌检测工作变得简单而纯粹。
创新点
一套检测方案,提高检测效率

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实际反应管颜色编码,减少操作错误

基于纳米技术的即用型裂解管,具有颜色变化功能,有助于过程观察

设备节省空间,能够同时检测多种致病菌